Testy immunologiczne.pdf

(1700 KB) Pobierz
TESTY IMMUNOLOGICZNE
Istnieje wiele odmian testów immunologicznych;
• wszystkie polegają na zajściu reakcji wiązania się antygenu ze swoistymi
(rozpoznającymi go) przeciwciałami,
• różnią się natomiast sposobem wykrywania tej reakcji.
Aglutynacja
Hemaglutynacja
Precypitacja
Odczyn wiązania dopełniacza
Testy immunoenzymatyczne
Testy immunofluorescencyjne IFA
Testy radioimmunologiczne RIA
BEZPOŚREDNIE
Ag + Ab
WYNIK
POŚREDNIE
Ag + Ab + Ab
2
WYNIK
Testy immunologiczne bezpośrednie
wykrywają określony antygen przy pomocy
znakowanych przeciwciał.
Antygeny wirusowe czy bakteryjne występują jednak
często w ustroju w bardzo niewielkiej ilości, która
znalazła by się poniżej progu detekcji. Z tego względu
często stosuje się
testy immunologiczne pośrednie
wykrywające immunoglobuliny, które uprzednio
związały się ze swoistym antygenem.
Testy immunologiczne pośrednie
wykrywają immunoglobuliny, które
uprzednio związały się ze swoistym
antygenem.
Opierają się one na na założeniu,
że
jeśli
organizm kręgowca zetknął się z konkretnym
antygenem, to w surowicy tego organizmu
będą się znajdywały swoiste wobec tego
antygenu przeciwciała. Ponieważ
immunoglobuliny jako takie mają właściwości
immunogenne (wywołują odpowiedź
immunologiczną), można uzyskać swoiste
przeciwciała skierowane wobec
immunoglobulin innego gatunku.
Charakteryzują się większą czułością, gdyż
wykorzystują naturalną zdolność układu
immunologicznego - amplifikację sygnału, jaki
dociera do układu immunologicznego w
postaci antygenu.
TESTY SEROLOGICZNE
Wszystkie testy przeprowadza się w obecności roztworu elektrolitów.
REAKCJA PRECYPITACJI
Zachodzi pomiędzy przeciwciałami a rozpuszczalnym antygenem
np. białkiem, wyizolowanym polisacharydem bakterii itp.
sprecypitowanych przeciwciał
Strefa równowagi
Nadmiar przeciwciał
Nadmiar antygenu
Ilość
Stężenie antygenu
Precypitacja probówkowa
Rozpuszczalny
antygen
W miejscu wytrącania się kompleksów
immunologicznych pojawia się opalizujący
prążek
Przeciwciała
PRECYPITACJA W
ŻELU
Reakcja dyfuzji radialnej wg Manciniego
• służy do ilościowej oceny antygenu
• przeciwciała unieruchomione są w
żelu
agarowym, antygen dyfunduje
Miejsce naniesienia
roztworu antygenu
Pole
precypitacji
24 h
Żel
agarowy
zawierający określone
rozcieńczenie przeciwciał
stężenie antygenu
Znane stężenia antygenu
x?
a
b
c
x
Pole precypitacji jest wprost proporcjonalne
do stężenia antygenu.
x
średnica
Reakcja podwójnej dyfuzji wg Ouchterlony’ego
• dyfundują cząsteczki antygenu i przeciwciała
Miejsce naniesienia
roztworu przeciwciał
Pole
precypitacji
Miejsce naniesienia
roztworu antygenu
REAKCJA PODWÓJNEJ DYFUZJI WG OUCHTERLONY’EGO
Pozwala określić czy badane antygeny zawierają identyczne, wspólne, czy też różne
determinanty antygenowe.
Znany
antygen
Badany
antygen
Przeciwciała swoiste wobec
określonego antygenu
Antygeny zawierają identyczne
determinanty antygenowe
Antygeny zawierają różne
determinanty antygenowe
A
A
A
anty-B
B
Łuk
precypitacji
Przeciwciała
anty-A
Przeciwciała
anty-A
i
anty-B
Antygeny zawierają wspólną
determinantę antygenową
Antygeny zawierają różne
determinanty antygenowe
A
anty-B
A+B
A
anty-B
B+C
anty-C
Przeciwciała
anty-A
i
anty-B
Przeciwciała
anty-A, anty-B
i
anty-C
Szybkość dyfuzji antygenu w
żelu
zależy od jego wielkości
(jest odwrotnie proporcjonalna do masy cząsteczki).
TESTY SEROLOGICZNE
AGLUTYNACJA
Zachodzi pomiędzy przeciwciałami a upostaciowanym antygenem.
Reakcję można zaobserwować w postaci „kłaczków”.
Antygen może znajdować się na powierzchni komórek bakteryjnych, eukariotycznych
lub być związany z cząstkami lateksu.
Bakteria
Przeciwciała IgM wiążą się z epitopami
bakterii
Najbardziej efektywnymi aglutyninami są IgM.
Aby doszło do porównywalnej aglutynacji antygenu z przeciwciałami IgG,
potrzeba 100 lub nawet 1000 razy więcej cząsteczek IgG.

Plik z chomika:

Inne pliki z tego folderu:

Inne foldery tego chomika:

Zgłoś jeśli naruszono regulamin